王祖贤,1967年1月31日生于台湾台北。1984年,王祖贤在台主演了电影处女作《今年的湖畔会很冷》,同时该片入围金马奖,之后签约香港邵氏电影公司并放弃了国光艺校的学业。2001年前后,王祖贤接受台湾中天卫视《真情指数》栏目,蔡康永专访,详述了她少年时代并不顺遂的求学生涯、以及无意间踏入光影世界的经历。1985年2月《再见七日情》上映,王祖贤在香港的演艺生涯正式开始。
2003年3月21日,齐秦在北京首都体育馆举办春分演唱会,尾声时大屏幕上放出了王祖贤在加拿大拍摄的问候视频。2003年,制片人、汤臣老板徐枫女士邀请王祖贤主演内地班底影片《美丽上海》,这是王祖贤电影生涯的告别之作,她在其中饰演一位在美国工作的上海大家庭的女儿,职业是电子工程师。王祖贤息影前最后一部电影《美丽上海》曾于2004年参展光州电影节,但王祖贤没有出席该活动。