华西都市报记者肖茹丹实习生赵诗柯

悬疑 家养山羊?野生斑羚?剥皮去骨之后两难分

求助 DNA鉴定，凭火柴头大小的肉丁确定是什么

一次典型DNA实验

检测仪器：恒温水浴锅高速冷冻离心机PCR仪等

实验方法：酚氯仿经典法DNA抽提

实验单位：四川农业大学生命科学学院实验室

实验目的：确定被肢解的动物种类

去年12月的一天，阳光拨开密林照到山间小溪，两名男子蹲坐四川省绵竹市金花镇三江村一处山沟，将猎捕来的两只野生动物剥皮、肢解。

两人以为，这样一来，只要咬定这是两只普通的山羊，就能掩人耳目。他们没想到的是，警方将两人挡获，随即将动物尸体送检。四川农业大学生命科学学院实验室通过DNA鉴定实验，从一块小肉丁，到提取DNA，再到数据库比对，最终确定两只被剥皮的动物是斑羚，为国家二级重点保护野生动物。

目前，根据实验结果，两人因涉嫌非法猎捕、杀害珍贵濒危野生动物，已移交绵竹市检察院起诉。

办案僵局/

村民猎杀斑羚 剥皮肢解掩耳目

去年12月14日，家住什邡市和绵竹市交界的李林约好友王强一起上山采药，走在山间小径上，草丛中的粪便和脚印引起了他们的注意。李林走近一瞧，这组脚印形似剪刀，和家养山羊的脚印颇为相似。

“逮两只回去吃!”两人不谋而合。随即，王强拿出随身携带的绳子，挽成圈，做成了三个圈套，并用杂草覆盖，引“羊”入套。

三天后，两人再次相约上山，查看三个圈套中有无猎物。上山后，他们远远地看到圈套位置有两只动物，已经死亡。尸体皮毛呈灰色，形似山羊，但四肢比较粗短，角也比较长。李林和王强把“猎物”装进尼龙袋里。

下山途中，两人商议将皮子剥了，既方便搬运，又能掩人耳目。在一处山沟，两人用弯刀将尸体剥皮、肢解，并将犄角等扔在了现场。让他们没想到的是，两人刚下山，就撞上了正在巡逻的绵竹市公安局金花镇派出所民警，肢解的动物尸体现场被扣押，并移交给了绵竹市森林公安。

据两人事后交代，他们当时已经意识到猎捕的这两只动物可能是保护动物，但因为皮毛不存、血肉模糊，两人一口咬定这只是普通的山羊。警方为确定这两只动物的具体种类，绵竹市森林公安只得按程序做DNA鉴定实验。

实验求证/

火柴头大小“肉丁” 提取DNA沉淀物

两只动物尸体被送往了四川楠山林业司法鉴定中心，随即被转送至四川农业大学生命科学学院的实验室做DNA鉴定实验。

在做好了实验前的无菌准备后，实验人员从动物腿部剪下一块火柴头大小的肉丁，剪碎成末，倒入装有生理盐水的离心管中进行浸泡清洗，又加入了细胞裂解缓冲液等试剂，用以分解细胞，消化部分蛋白质。四川农业大学生命科学学院徐怀亮教授说，细胞中的DNA是与蛋白质、糖类等其他物质混杂在一起，为了纯化DNA，必须去除蛋白质。

接下来，实验人员将离心管置入恒温水浴锅里过夜。第二天，实验人员又将事先调配好的酚氯仿混合溶液滴入离心管中。如此一来，即可去除细胞中不需要的糖类、蛋白质等，只留下DNA。

接下来，在离心机的高速运转下，管内出现了“两极分化”：上层是清液，下层是沉淀物。反复多次分离实验后，再经过酒精、冷冻、离心机分层等步骤，管底出现了一些白色沉淀物——这就是DNA。最后，实验人员将上层清液吸出，在室温环境中静置30分钟，等酒精挥发3个小时，就是纯化后的DNA。

数据库比对

“猎物”确为二级保护动物

提取到最终的DNA后，实验人员又对其加入灭菌水溶解，放进冰箱保存备用。而后通过专业的检测仪器，将一个小小的DNA片断扩增至1000万倍以上制成数据。在经过序列测定获得DNA序列后，与已有的数据库比对。最终确定李林和王强所捕杀的“野羊”是国家二级重点野生保护动物斑羚。

“DNA片断上都搭载着每个物种独一无二的信息，就像动物的身份证，因此一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA的鉴定工作，”徐怀亮透露，目前四川农大生命科学学院实验室的DNA数据库有数百种动物资料，包括大熊猫、金丝猴、黑熊、绿尾虹雉、红腹锦鸡等多种珍稀动物。

根据实验结果，最终确定两只被剥皮的是斑羚，为国家二级重点保护野生动物。李林和王强也因涉嫌非法猎捕、杀害珍贵濒危野生动物罪，移交绵竹市检察院起诉。(文中犯罪嫌疑人为化名)

DNA鉴定，为何神准

“DNA片断上都搭载着每个物种独一无二的信息，就像动物的身份证，因此一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA的鉴定。”——四川农业大学生命科学学院徐怀亮教授

延伸阅读/

“毁容”逃不出DNA“火眼”

四川楠山司法鉴定中心负责人应晓峰透露，鉴别动物主要分为外形甄别和DNA鉴定。一些不法分子自以为破坏外观可以逃避法律制裁，但实际上DNA鉴定已成为多起非法猎捕、贩卖野生保护动物案件中的有力证据。

据不完全统计，每年四川农大生命科学学院实验室接收的动物DNA鉴定就多达十几起，几乎都与省内的非法猎捕野生保护动物案件相关：2015年森林公安送来一具动物尸体的肌肉组织，最终鉴定出是国家一级重点野生保护动物羚牛;前几年，地方动物园送来一批被盗的动物骨头，把骨髓取样，用类似的提取方法，最终确认为东北虎。

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